市面上现有PCR仪器都有以下几个弊端:1.由于PCR灵敏度极高,实际应用中污染较严重,一旦有少量外源性污染就可出现假阳性结果。2.条件控制不当会造成各种产物突变,从而降低特异性和灵敏度。3.PCR技术需要以已知DNA模板作为扩充模板,必须知道引物的结合部位序列才能合成特异性引物,局限性较大。巧亦捷核酸一体机采用薄膜微流控技术,检测过程为全封闭且自动进行核酸提取及PCR扩增,无需高标准的检测环境,可很大程度上降低污染。结果快速、准确且稳定。巧亦捷全自动核酸检测一体已实现覆盖猫、犬肠道类、呼吸道类、血液类、人畜共患类等多种病原体的诊断。江苏动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用
在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。两者的区别:胶体金是针对病毒蛋白质的检测,PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的,因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增,因此当样本中病毒量少的情况下,就有可能无法找到病毒;而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增,所以PCR检测的灵敏度就更高,更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上,胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性;但如果样本病毒量低于10万,则只能依靠PCR技术。江苏巧亦捷PCR仪器生产企业常用的qPCR方法有荧光染料法(SYBR Green I)和探针法(TaqMan)。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。
开展动物疫病检测,有利于及时明确动物病因及根源所在,降低疫病发生率,提高诊疗效果,促进养殖业可持续发展。可以对动物疫病起到预防作用,真正准确分析当前动物疫病的流行特征及其可能对周边造成的危害。提高动物产品质量,使人们的食品安全得到尽可能的保障。现阶段主流的动物疫病检测方法主要有传统检测、血清学检测和核酸检测。核酸检测作为动物疫病检测中常用的方法之一,具有实验周期短、灵敏度高、特异性强、实时定量等优势。巧亦捷核酸一体机针对不同传染病的检测效果相同。不存在免疫学方法中出现的猫类检测试纸卡效果不佳的情况。
说PCR仪(尤其是实时荧光PCR仪)是动物诊断工具的中流砥柱毫不为过。然而,即时、快速和准确的检测是广大兽医站和养殖场对检测仪器更高的诉求。面对传染性疾病,用户对便携、易操作、准确性高、成本相对低廉的检测设备需求更为迫切。事实上,以微流控芯片作为耗材,搭配后端定量PCR的检测在临床检测领域已有成型产品——即巧亦捷全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机。它实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,样本进,结果出,检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,特别适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。传统的免疫学检测(如:荧光和胶体金)存在灵敏性和特异性的局限性。江苏动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用
无论是猪瘟、蓝耳、牛鼻支、牛腹泻等畜禽类传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行准确诊断。江苏动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用
巧亦捷(ingeNova)是翊新诊断技术(苏州)有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌,以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测,非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测,牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测,人畜共患病核酸检测,以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台,巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。翊新诊断技术(苏州)有限公司由微流控技术领域国际**周朋博士创立。公司依托先进的薄膜微流控技术开发一体化、智能化的快速、便捷的POCT体外分子诊断解决方案。针对动物疫病的早期诊断,公司以市场需求为出发点,开发出了低成本、无污染、能够实现真正意义上“全自动,全封闭,样本进,结果出”的薄膜微流控芯片技术和可以用于动物疫病现场快速诊断的分子检测系统,从而为动物疫病的现场诊断提供更加便利的检测手段。目前已开发非洲猪瘟检测、宠物呼吸道多联检测、宠物消化道多联检测等多种试剂及检测方案。江苏动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用